Cyr61在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、上皮间质转化和自噬的影响

摘要

目的探讨富含半胱氨酸蛋白 61( Cyr61)在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、上皮间质转化和自噬的影响。方法收集手术切除的前列腺癌组织和癌旁正常组织,分别使用免疫组织化学染色、荧光定量聚合酶链式反应(RT - PCR)和蛋白质免疫印迹( WB)检测组织中 Cyr61 的表达。将 PC - 3细胞分为空白组、siControl 组和 siCyr61 组,siCyr61 组使用RNA 干扰将 Cyr61 沉默,siControl 组和空白组分别使用无关序列和 PBS 作为对照。qRT - PCR检测细胞中 Cyr61 mRNA 的表达,WB 检测细胞中 Cyr61、E -钙黏蛋白、波形蛋白、p - PI3K、p - AKT 蛋白的表达,免疫荧光染色检测细胞中 LC - 3Ⅱ的表达,MTT 试验检测细胞增殖情况。结果 Cyr61 在前列腺癌旁组织中呈阴性或低表达,而在前列腺癌组织中的表达水平升高。与癌旁组织相比较,前列腺癌组织中 Cyr61 mRNA 和蛋白质的表达水平升高,差异有统计学意义( P < 0. 05)。与空白组和 siControl 组相比较,siCyr61 组细胞中 Cyr61 mRNA 和蛋白质明显降低,差异有统计学意义( P < 0. 05);在培养 24、48、72 h 时 OD 值降低( P < 0. 05);E -钙黏蛋白的表达升高,波形蛋白的表达降低( P < 0. 05);LC - 3Ⅱ的荧光强度较高;p - PI3K 和 p - AKT 的表达降低( P < 0. 05)。结论 Cyr61 在前列腺癌患者的癌组织中高表达,使用RNA 干扰将 Cyr61 沉默后可以抑制人前列腺癌 PC - 3细胞的增殖,降低上皮间质转化相关蛋白的表达,促进自噬的发生,可能与对 PI3K/AKT 信号通路的抑制有关。