胶质瘤干细胞和胶质瘤间充质干细胞原代培养的一种新方法

摘要

cqvip:目的采用患者来源的胶质瘤组织进行原代培养,对胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSCs)和肿瘤性间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)进行了分选和鉴定。探讨GSCs和MSCs对胶质瘤的生长、耐药等的作用。方法取高级别胶质瘤手术标本剪碎后使用Ⅱ型胶原酶消化为单细胞悬液。一部分使用GSCs培养基成球悬浮培养,另一部分使用MSCs培养基贴壁培养。GSCs鉴定方法为免疫荧光法检测GSCs相关蛋白分子,如高度表达CD133、SOX-2和Nestin,低表达GFAP和Ⅲβ-tubulin。MSCs鉴定标准为成骨、成软骨以及成脂肪三系分化阳性。结果对62例高级别胶质瘤手术标本进行原代培养,课题组成功分选出13例同源的GSCs和MSCs。结论课题组使用最新并优化的原代培养技术,成功将患者来源的高级别胶质瘤手术标本中培养出GSCs和MSCs,建立了同源的GSCs和MSCs亚群研究模型。