多重PCR快速诊断单纯疱疹病毒、真菌及棘阿米巴角膜炎

摘要

目的 建立多重PCR体系对单纯疱疹病毒(HSV)、真菌及棘阿米巴性角膜炎同时诊断,并对真菌性角膜炎主要致病真菌进行菌属鉴定.方法 建立两个多重PCR体系,检测HSV Ⅰ型、HSVⅡ型、4株棘阿米巴分离株及9种主要真菌性角膜炎致病真菌,比较该体系对真菌临床菌株、人类基因组及其他血液常见致病微生物的检测效果.结果 根据DNA模板,该体系可扩增出不同特异性条带,能够准确检测HSV和棘阿米巴,并将9种待测真菌分为4个菌属.84株真菌受试菌株中81株的鉴定结果与常规鉴定结果一致.该体系对人类基因组及其他血液常见致病微生物DNA的扩增结果均为阴性.模板最低阳性扩增的浓度均为10 fg.结论 通过两个多重PCR体系可同时诊断HSV、真菌及棘阿米巴性角膜炎,并可将真菌性角膜炎在菌属水平进行鉴定.该方法具有高效、简便、特异、灵敏的特点,具有较好的临床应用前景.