miR-499与miR-1对心肌细胞增殖与凋亡调控作用及机制研究

摘要

目的:探究心肌细胞增殖与凋亡过程中,miR-499与miR-1所发挥的调控作用及其机制.方法:采用LipofectamineTM2000将miR-499 mimics和miR-1 inhibitor转染至H9C2心肌细胞,并采用RT-PCR检测转染情况.实验分组:空白对照组、H2O2组(未转染的H9C2心肌细胞)、干预组A(miR-499 mimics转染的H9C2心肌细胞)、干预组B(miR-1 inhibitor转染的H9C2心肌细胞)、干预组C(miR-499 mimics+miR-1 inhibitor转染的H9C2心肌细胞).通过H2O2建立心肌细胞氧化应激模型.采用CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western Blot检测Bcl-xl、Bax蛋白表达水平.结果:H2O2组细胞增殖较空白对照组减少(P<0.05),细胞凋亡率较空白对照组增加(P<0.05).干预组A、干预组B、干预组C细胞增殖较H2O2组增加(P<0.05),而细胞凋亡率较H2O2组减少(P<0.05).H2O2组的Bcl-xl蛋白表达水平较空白对照组降低(P<0.05),而Bax蛋白表达水平较空白对照组升高(P<0.05).干预组A、干预组B、干预组C Bcl-xl蛋白表达水平较H2O2组升高(P<0.05),Bax蛋白表达水平较H2O2组降低(P<0.05).结论:miR-499与miR-1对心肌细胞增殖与凋亡具有重要调控作用,miR-499可能通过上调Bcl-xl、下调Bax蛋白表达抑制心肌细胞凋亡,而miR-1则通过下调Bcl-xl、上调Bax蛋白表达促进心肌细胞凋亡.