体外小鼠nuocyte细胞中IL-13的干预促进CD4+T细胞向CD4+IL10+细胞的分化

摘要

目的 探讨体外小鼠nuocyte细胞中IL-13的干预对CD4+ IL10+细胞的分化的影响.方法 用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)建立小鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型(n=6),正常组注射生理盐水(n=6).计数AR小鼠的打喷嚏、挠鼻次数,分离、提纯并体外培养小鼠鼻相关淋巴组织(nasal-associated lymphoid tissue,NALT)中的nuocyte细胞;构建针对小鼠IL-13的shRNA,并用慢病毒将IL-13 shRNA转染体外培养的AR小鼠nuocyte细胞,分别检测转染前后培养基中nuocyte细胞在鼠重组(recombinant,rm) IL-33作用下分泌IL-13和IL-10的浓度;获取AR小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)并分离出CD4+T细胞进行体外培养,然后将体外培养的nuocyte细胞加入上述小鼠CD4+T细胞培养基共培养,检测CD4+IL10+细胞所占CD4+T细胞的百分比.结果 小鼠AR模型打喷嚏和挠鼻次数较正常小鼠显著增多,OVA诱导NALT来源的小鼠nuocyte细胞被鉴定为CD3CD4CD8CD1 9CD11 bCD1 1cFcεR1 (lineage)-ICOS+,AR小鼠的nuocyte细胞数较正常小鼠显著增多,携带有IL-13 shRNA的慢病毒成功转染到体外培养的nuocyte细胞.转染前经rmIL-33的刺激,培养基中IL-13和IL-10的浓度均升高,差异具有统计学意义;转染后培养基中IL-13的含量无明显增多,而IL-10含量明显增多,转染前后IL-13和IL-10的浓度差异具有统计学意义,IL-13浓度降低,IL-10浓度升高,而且转染后CD4+ IL10+细胞占CD4+T细胞的百分比也增加,差异具有统计学意义.结论 体外小鼠nuocyte细胞中IL-13的干预可能促进CD4+IL10+细胞的分化.