脑缺血后PUNT的表达及其与DNA合成标记物的关系

摘要

目的研究脑缺血后DNA的损伤及其与DNA合成的标记物--溴代尿嘧啶脱氧核苷(bromodeo-xyuridine,BrdU)掺入的关系.方法采用PUNT(in situ DNA polymerase I-mediated DIG-dUTP nick-transla-tion)染色方法检测DNA的单链断裂(single strand breaks,SSB),用免疫荧光双标法观察BrdU的掺入与DNA损伤的关系.结果(1)PUNT染色阳性细胞表达的时程变化显示,缺血缺氧(hypoxic-ischemia,H-I)后0.5 h,缺血侧纹状体就可检测到PUNT染色阳性细胞的表达.除H-I后3 h阳性细胞数出现一个小高峰外,H-I后1到12h,阳性细胞数处于较低水平.从H-I后24 h起,阳性细胞数显著上升,到2 d时达最高峰.H-I后4和6 d,阳性细胞数仍然维持在较高的水平.(2)H-I后2到6 d,BrdU与PUNT染色阳性细胞共表达.结论H-I后早期出现DNA的损伤,BrdU的掺入与DNA的损伤有关.