暴马桑黄倍半萜合酶基因SbTpsl的克隆及表达分析

摘要

倍半萜(Sesquiterpenes)在动植物及微生物体内广泛存在,且具有重要的生理调节功能.本研究从暴马桑黄转录组数据库中筛选出1个编码暴马桑黄萜类合酶的基因,命名为SbTp.s1,并对其进行克隆及表达分析,经测序该基因全长1 281 bp,编码426个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量为48.17 ku.SDS-PAGE分析结果表明,在相对分子质量69.17 ku(包含21 ku标签蛋白)附近出现与预期大小一致的蛋白条带.系统发育进化树分析表明,暴马桑黄SbTpsl蛋白和嗜蓝孢孔菌Tps蛋白同源性最高;荧光定量分析结果表明,SbTps1基因转录水平在不同发育阶段有差异性,并且在菌丝发酵培养第14天时SbTpsl基因转录水平达到最高状态,该结果与鲍姆纤孔菌(Inonotus baumii)倍半萜合酶基因的转录水平变化趋势相似,因此可以推测SbTpsl与倍半萜合成有关,初步鉴定该基因为倍半萜合酶基因,为后续暴马桑黄倍半萜合酶基因功能的研究奠定理论基础.