大胚龄人神经干细胞长期冻存后的复苏培养

摘要

目的 探讨长期冻存后的大胚龄人胚神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的生长及其生物学特性.方法 分别于冻存后6、12及24个月,快速解冻复苏胚龄为16～20周的胎脑细胞,采用无血清培养液悬浮培养.观察培养细胞的活性及成球时间,采用免疫细胞化学方法鉴定这些细胞球及其分化成熟后的细胞表面标志.结果 培养传代的细胞透亮、成球时问短,与取自新鲜胎脑的神经干细胞无明显区别.细胞球Nestin染色阳性,成熟分化后神经元特异性烯～M(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP.)及2,3',-环腺苷酸-3,-磷酸二酯酶(CNPase)抗原呈阳性.结论 长期冻存后的人大胚龄神经干细胞仍具有较强增殖能力及多分化潜能.