基于微流控的核酸片段分离技术用于伤寒沙门菌MLVA分型的研究

摘要

目的 探讨和优化基于微流控技术的DNA片段分离技术用于伤寒沙门菌多位数目可变串联重复序列分析(MLVA)的方法.方法 制备与分析片段长度相似的内标来提高实验结果分析的重复性;用Agilent2100分析仪和序列测定技术分析伤寒沙门菌10个数目可变串联得复序列(VNTR)位点的PCR产物,比较2种方法的一致性,优化基于微流控的DNA片段分析技术.结果新内标能够提高方法的重复性;使用Agilent 2100分析仪电泳以及新内标校正片段后,具备相同重复单元拷贝数的VNTR扩增产物具有相同的电泳位置,通过序列测定证实了这些分析结果.结论 优化的基于微流控技术的DNA片段分离方法能够提高短重复序列MLVA分析的准确性,可应用于伤寒沙门菌的MLVA分析.