氨基糖苷类药物耐药基因armA实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

摘要

目的 建立一种快速、准确检测细菌中armA耐药基因的TaqMan实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative-polymerase chain reaction,real-time PCR)方法.方法 根据armA基因设计特异的引物及探针,在多种常见致病菌中检测其特异性;使用阳性质粒标准品评价该方法的灵敏度;使用粪便模拟标本验证该方法的应用性.结果 本方法特异性好,建立的armA耐药基因real-time PCR方法标准曲线,确定其对质粒标准品的灵敏度为4.07×101拷贝/ml.应用该方法对粪便模拟标本进行检测,其检测下限为1.3×104cfu/ml.结论 本研究建立了armA耐药基因荧光定量PCR检测方法,有望在耐药基因监测中推广使用.