油菜几丁质酶的纯化及其在抗菌核病中的作用

摘要

油菜叶片经油菜菌核病菌 （ Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ ） 或水溶性壳聚糖处理后， 几丁质酶活性明显提高， 分别在处理后 １ ｄ 和 ２ ｄ 达活性高峰， 比对照分别高５ 倍和２ 倍左右。被激发提高的几丁质酶表现为内切酶活性， 细胞间的几丁质酶比活力显著高于细胞内的酶比活力。菌核病菌侵染后的油菜叶片提取液经６０％ 饱和度的硫酸铵沉淀，再通过再生几丁质柱亲和层析得到了纯化的几丁质酶， 经 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 显示单一的谱带， 其相对分子质量为 ３２ ０００。纯化的油菜叶片几丁质酶能降解油菜菌核病菌菌丝细胞壁， 在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上可抑制菌丝生长。