乌司他丁联合血必净对海水浸泡腹腔开放伤大鼠肠屏障功能的保护作用

摘要

目的:研究乌司他丁(ulinastatin,UTI)联合血必净对海水浸泡腹腔开放伤大鼠肠屏障功能的保护作用及机制.方法:104只♂Wistar大鼠随机分为13组:对照组(A组),海水浸泡腹腔开放伤生理盐水治疗1、3、6 h组(B组),UTI处理1、3、6 h组(C组),血必净处理1、3、6 h组(D组),UTI联合血必净处理1、3、6 h组(E组);每组8只,分别在术后第1、3、6 h采集血液、小肠组织标本,观察血浆二胺氧化酶、内毒素水平、小肠组织镜下病理学变化.应用酶联免疫分析法检测血浆肿瘤坏死因子a(tumor necrosis factor-a,TNF-a)、白介素6(interleukin-6,IL-6)、内毒素(endotoxin,ET)含量,分光光度法检测血浆中二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO),黄嘌呤氧化酶法测定小肠超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测小肠丙二醛(malondialdehyde,M D A)含量,荧光法检测小肠组织细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.非放射性凝胶迁移实验法检测小肠组织核转录因子-aB(nuclear transcription factor-aB,NF-kB)p65活性.结果:术后6 h,C组和D组较B组血浆SOD(75.34 U/mg±4.60 U/mg,75.01 U/mg±4.22 U/mg vs 67.38 U/mg±4.20 U/mg,P<0.05)明显升高,而血浆DAO(13.64 U/mL±1.08U/mL,13.87 U/mL±1.19 U/mL vs 17.06 U/mL±1.56 U/mL,P<0.05)、ET(0.635 eU/L±0.037 eU/L,0.604 eU/L±0.027 eU/L vs 0.728eU/L±0.038 eU/L,P<0.01)、TNF-a(122.10pg/mL±9.72 pg/mL,121.93 pg/mL±8.67 pg/mL vs 143.89 pg/mL±8.13 pg/mL,P<0.01)、IL-6(261.60 pg/mL±8.73 pg/mL,268.06 pg/mL±6.87 pg/mL vs 293.42 pg/mL±10.44 pg/mL,P<0.01)、小肠组织镜下病理学评分、小肠组织MDA(5.29 nmol/mg±0.44 nmol/mg,5.26 nmol/mg±0.42 nmol/mg vs 6.40±0.53nmol/mg,P<0.01)、ROS含量(83.72 mg/mL±2.89 mg/mL,74.69 mg/mL±2.94 mg/mL vs130.13 mg/mL±3.89 mg/mL,P<0.01)、NF-kB p65(122.53±7.02,98.61±7.86 vs 202.60±8.06,P<0.01)明显降低.E组较C组血浆DAO、ET、TNF-a、IL-6、小肠组织镜下病理学评分、小肠组织MDA、ROS、NF-kB p65明显降低(11.39 U/mL±1.23 U/mL vs 13.64 U/mL±1.08 U/mL,0.528 eU/L±0.036 eU/L vs 0.635eU/L±0.037 eU/L,110.40 pg/mL±5.99 pg/mL vs 122.10 pg/mL±9.72 pg/mL,213.88 pg/mL±11.69 pg/mL vs 261.60 pg/mL±8.73 pg/mL,小肠,4.74 nmol/mg±0.25 nmol/mg vs 5.29nmol/mg±0.44 nmol/mg,56.31 mg/mL±3.61mg/mL vs 83.72 mg/mL±2.89 mg/mL,61.05±6.69 vs 122.53±7.02,P<0.05),SOD明显升高(85.49 U/mg±3.87 U/mg vs 75.34 U/mg±4.60U/mg,P<0.05);C、D组相比没有显著差异.结论:UTI联合血必净对海水浸泡腹腔开放伤大鼠肠屏障功能有较好的保护作用,其机制可能与抑制NF-kB及其相关炎症因子表达、减轻氧化应激损伤有关.