至真方含药血清对人大肠癌多药耐药细胞HCT-8/VCR内核因子κB活性及P-糖蛋白表达与功能的抑制作用

摘要

目的:探讨至真方是否能够调节核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)并影响P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达与功能。方法:细胞增殖-毒性检验(cell counting kit-8,CCK-8)法鉴定HCT-8/VCR细胞株的多药耐药性。分别用8%、16%、32%体积分数的至真方含药血清干预人大肠癌敏感细胞株HCT-8与多药耐药细胞株HCT-8/VCR,时间为24h。CCK-8法检测细胞的存活率以筛选含药血清的实验浓度,酶联免疫吸附测定法检测细胞核内NF-κB的转录活性,激光共聚焦显微镜检测P-gp在细胞内的分布,流式细胞仪测定细胞内罗丹明123(rhodamine 123,Rh123)的平均荧光强度。结果:HCT-8/VCR含药血清组NF-κB活性较HCT-8/VCR阴性对照组明显降低(P<0.01),在一定范围内与浓度呈负相关。P-gp逐渐弥漫分布于细胞质和细胞核,并出现核固缩、核裂解,同时平均荧光强度呈浓度梯度下降(P<0.01)。在Rh123蓄积实验中,经8%、16%、32%含药血清作用后,HCT-8/VCR细胞波峰右移,细胞内荧光强度明显增强(P<0.01)。结论:至真方含药血清能抑制HCT-8/VCR细胞内NF-κB的活性,降低P-gp的表达与功能。