芍药愈伤组织中体细胞胚发育过程的组织细胞学观察

摘要

以芍药(Paeonia lactiflora Pall.)3个芍药品种的茎段、叶片、叶柄为外植体,诱导体细胞胚发生,并采用石蜡切片法对该发育过程进行组织细胞学观察。结果表明:‘Going Bananas’的茎段愈伤诱导率达100%,增殖率在4.0以上,表现最佳;非胚性愈伤组织最佳诱导、增殖培养基为WPM+IAA 1.0 mg·L^(-1)+6-BA 1.0 mg·L^(-1)+NAA 0.5 mg·L^(-1)+TDZ 0.5 mg·L^(-1)+CH 0.625 g·L^(-1);愈伤组织转入到1/2 MS(Ca^(2+)加倍)+2,4-D 2.0 mg·L^(-1)+ABA 0.5 mg·L^(-1)或ZT 1.0 mg·L^(-1)的培养基中,连续暗培养90后得到胚性愈伤;之后转入到成熟培养基1/2MS(Ca^(2+)加倍)+6-BA 1.0 mg·L^(-1)+NAA 0.2 mg·L^(-1)中,见光培养60 d,逐渐发育至球形胚和心形胚。在石蜡切片观察中,芍药的体细胞胚起源方式包括外起源和内起源两个途径。在外起源方式中包括单个表层细胞的外起源和多个表层下细胞的共同起源。3种方式的区别主要在于起始的位置和起始细胞数量,后期均形成原胚结构。胚性细胞的分裂方式为对称分裂,未发现不对称分裂细胞的存在。