rAAV-Fab转染小鼠骨骼肌体内表达分析

摘要

目的乙肝表面抗体是一种保护性抗体,利用基因重组法构建含乙肝表面抗原抗体Fab基因的重组腺相关病毒(rAAV-Fab),通过转染小鼠腿部骨骼肌,观察此种转染途径,Fab的表达情况。方法肌肉注射1011、5×1010、5×1093种滴度的rAAV-Fab,感染小鼠腿部肌肉组织,用荧光免疫吸附法检测血清中Fab含量变化。免疫组化分析表达分布。病理组织学检测转染后组织损伤。结果小鼠肌注rAAV-Fab后,2个月内在血清中均有持续较高表达Fab,其后呈现较低趋势,直至第4个月观察结束。转染后,全身多个脏器组织切片均可检测到阳性信号,但3种病毒滴度转染比较,肝脏转染并无差异。主要脏器病理检查结果为阴性。结论骨骼肌转染rAAV-Fab能够有效介导Fab基因在小鼠体内表达,转染广泛,且此方法安全有效,为进一步实验研究提供了依据。