小叶章DaGST基因克隆及启动子分析

摘要

为了解小叶章（Deyeuxia angustifolia Kom.）中GST基因的生物学信息，为后续研究GST基因在小叶章中的功能提供理论基础。利用RT-PCR技术和染色体步移法克隆小叶章GST基因及其上游启动子序列，对其进行生物信息学分析和启动子的顺式作用元件分析。克隆得到小叶章GST基因的cDNA序列，命名为DaGST，其开放阅读框为703 bp，编码233个氨基酸，蛋白质相对分子量为25.45 kD。保守结构域预测小叶章DaGST蛋白含有GST-N-Tau和GST-C-Tau两个典型的结构域。系统进化分析表明小叶章DaGST蛋白与大麦（Hordeum vulgare）亲缘关系最近，其次为山羊草（Aegilops tauschii）。克隆得到1 184 bp启动子序列，启动子结构分析表明，小叶章DaGST基因启动子除具有典型的TATA-box、CAAT-box作用元件外，还包括激素响应元件（ABRE, MeJA, SA）等。通过小叶章DaGST基因及启动子的分析，为进一步阐明小叶章的胁迫应答机制提供理论依据。