动物组织DNA提取前处理方法的优化研究

摘要

为优选拍击式均质法提取动物组织DNA的影响因素,开发一种简便快速的动物组织DNA提取前处理方法。研究采用L25(56)正交设计试验,以猪肉组织为对象,对拍击式均质法提取DNA前处理过程中不同的稀释倍数、拍击时间、拍击次数、取样量和消解时间进行工艺优化,按照优化后的前处理方法对8种生鲜肉或加工肉进行DNA提取,并进行定量PCR扩增验证。结果表明:当稀释倍数为1:2和1:3(g/g)、拍击时间为1 min、拍击次数为10次/s、取样量为100 mg,消解时间为1.5 h时,拍击式均质法提取的猪肉组织DNA质量最好,采用最佳优化条件对8种生鲜肉或加工肉提取的DNA与液氮研磨法提取的DNA定量PCR扩增,2种前处理方法提取DNA结果扩增曲线和Ct值均无差异,所开发的拍击式均质法提取动物组织DNA科学可行。