高效液相色谱法测定卤肉制品中酸性橙Ⅱ染料

摘要

目的建立操作简便、灵敏度高的高效液相色谱测定卤肉制品中酸性橙Ⅱ的方法。方法样品经均质,取2 g粉碎样品,乙醇震荡提取5 min,提取液经聚酰胺固相萃取柱分离净化。采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm)分离,以甲醇-乙酸铵溶液梯度洗脱,流速为1 ml/min,设定柱温30℃,进样体积为10μl,二极管阵列检测器检测酸性橙Ⅱ(λ=484 nm)并测定卤肉中酸性橙Ⅱ的含量及加标回收率,并作方法学论证。结果酸性橙Ⅱ在0.1μg/ml^20μg/ml的范围内,线性关系良好,线性方程为y=34.94x-2.697,r=0.9998。酸性橙Ⅱ最低检出浓度为0.08μg/ml。样品添加浓度为0.5 mg/kg^15 mg/kg时,方法回收率为96%~99%,相对标准偏差为3.39%~7.31%。结论用HPLC法检测非法添加于卤肉中的酸性橙Ⅱ的含量,该操作简便,定量准确可靠。