建立酶标仪法检测沙棘的羟自由基清除活性

摘要

基于Fenton反应原理,以吸光度值为指标,通过单因素实验建立了基于酶标仪检测的羟自由基清除活性测定方法,确定的最佳检测条件为:水杨酸浓度10 mmol/L、盐酸浓度2.5 mmol/L、硫酸亚铁浓度3.6 mmol/L、H2O2浓度0.88 mmol/L、反应时间20 min、反应温度37℃、510 nm测定。应用该方法测定了10批沙棘清除羟自由基的活性,同时分析了其与沙棘总黄酮含量的相关性。结果表明,沙棘具有较好的清除羟自由基的活性,所得结果与传统的紫外分光光度法检测结果较为一致,有较好的可比性。沙棘总黄酮含量与其清除羟自由基活性具有明显相关性(P<0.05,r=—0.690),表明总黄酮可能是沙棘清除羟自由基的主要活性成分之一。文章首次建立了基于酶标仪检测的羟自由基清除活性测定方法,具有消耗的试剂和样品量少、方法简单实用、可操作性强、结果稳定可靠等优点,可快速、高通量进行羟自由基清除剂的筛选。