胸膜肺炎放线杆菌ApxIA在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化

摘要

以胸膜肺炎放线杆菌1型参考菌株App-259株基因组DNA为模板,PCR扩增apxIA全基因,构建表达重组质粒apxIA-c2X,并将其转化至大肠杆菌TB1,SDS-PAGE和Western-blot分析表达产物。结果表明:成功构建了apxIA-C2x表达质粒,重组菌在15℃经0.2 mmol/L IPTG诱导16 h获得高效表达,融合蛋白大小为150 ku左右,目的蛋白约50%可溶,可溶蛋白经Amylose树脂亲和柱纯化,纯度可达到95%。本研究为猪传染性胸膜肺炎诊断抗原和亚单位疫苗的研制奠定了基础。