ATP8基因在小鼠单个GV期卵母细胞中的表达和生物信息学分析

摘要

目的:探讨小鼠GV期卵母细胞线粒体中ATP合酶亚基8(ATP8)基因的表达情况及其生物信息学的分析。方法:应用挤压法从卵巢中分离获得生发泡期(germinal vesicle,GV)卵母细胞,用RT-PCR检测GV期单个卵母细胞中ATP8基因的表达;将GV期单个卵母细胞直接进行RT合成cDNA,然后再对回收产物构建克隆质粒并测序,最后用VECTOR NIT9.0、RNAdraw和Treeview等工具对测序结果进行生物信息学分析。结果:琼脂糖电泳结果表明ATP8基因在GV期卵母细胞中有表达;测序结果显示所测昆明小鼠ATP8序列与Genbank序列完全一致;mRNA二级结构图显示12种动物间的ATP8氨基酸序列和ATP8核酸序列有较大差异,其中不同品种小鼠间也有差异;不同物种ATP8核苷酸序列构建出的分子进化树中,小鼠与棕熊进化距离较远,与田鼠、家猫进化距离相对较近。结论:小鼠GV期卵母细胞特异表达的ATP8基因与卵母细胞的正常发育成熟相关。