下调糖蛋白130基因表达对HaCaT细胞体外增殖及IL-6水平的影响

摘要

目的探讨下调糖蛋白(glycoprotein,gp)130基因表达对人永生化角质形成细胞株(human immortal keratinocyte colony HaCaT cells,HaCaT)细胞体外增殖及IL-6水平的影响。方法设计并合成三条gp130的siRNA,转染HaCaT细胞后,从mRNA表达、蛋白质水平上检测gp130,筛选出最适siRNA序列及浓度用于后续实验。转染HaCaT细胞24h,48h,MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞增殖周期;荧光定量PCR法检测mRNA表达;Western blotting印迹法检测蛋白水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中IL-6水平。结果 siRNA-1与siRNA-NC、空白对照组相比,HaCaT细胞增殖率及增殖周期在24h时差异均无统计学意义(均P>0.05),48h时差异均有统计学意义(均P0.05),48h时差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论下调gp130基因可抑制角质形成细胞增殖,影响角质形成细胞增殖周期,并可抑制IL-6的表达和分泌。