牛λ3干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性检测

摘要

牛λ3干扰素(BoIFN-λ3)是一种新型干扰素,可应用于牛传染性疾病的防治.在家蚕杆状病毒表达系统中可实现BoIFN-λ3的高效表达.首先在优化合成的BoIFNλ3基因起始密码子上游引入Kozak序列,将其克隆至转移载体pVL1393,获得pVL1393-BoIFN-λ3重组质粒.利用本实验室构建的家蚕杆状病毒表达系统,获得整合BoIFN-λ3基因的重组家蚕杆状病毒,将重组病毒感染五龄起蚕,在蚕血淋巴中得到表达产物BoIFN-λ3.采用微量细胞病变抑制法在MDBK/VSV* GFP系统检测蚕体中表达BoIFN-λ3的效价可达(2.7±0.12) ×105 U/mL,利用空斑筛选法筛选重组病毒,测得最高表达量的重组病毒表达的BoIFN-λ3的效价可达(8.1±0.52)×105 U/mL,表达量提高3倍.家蚕杆状病毒表达系统为优质高效的牛λ3干扰素产品的生产提供了一种新方法.