RON变异体RON△170对自身酪氨酸磷酸化变异体RON△160的显性抑制作用

摘要

目的 研究受体型酪氨酸激酶RON的变异体RON△170对RON的自身酪氨酸磷酸化变异体RON△160的作用.方法 NIH-3T3和3T3-RON△160细胞转染质粒pcDNA3.1-RON△170,建立3T3-RON△170和3T3-RON△160△170细胞株:流式细胞仪检测RON△170蛋白的表达;免疫沉淀法检测RON的酪氨酸磷酸化:软琼脂培养法观察RON△170对3T3和3T3-RON△160细胞生长能力的作用.结果 成功建立3T3-RON△170和3T3-RON△160△170细胞株,流式细胞仪胞膜蛋白检测法证明其稳定表达RON△170蛋白;免疫沉淀试验结果显示RON△170能明显抑制RON△160的RON酪氨酸磷酸化;软琼脂生长实验示3T3、3T3-RON△160、3T3-RON△170和3T3-RON△160△170细胞生长克隆数比较,差异有统计学意义(t=7.93,P＜0.05).结论 受体型酪氨酸激酶RON的变异体RON△170无酪氨酸磷酸化功能,且具有显性抑制变异体特性.