姜黄素阻断ERK1/2信号通路抑制前列腺癌PC-3细胞增殖的研究

摘要

目的 探讨姜黄素对前列腺癌PC-3细胞株细胞增殖的抑制作用.方法 不同浓度(5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L 4个浓度及空白对照组)姜黄素作用于PC-3细胞1 d、2 d、4 d、6 d后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测PC-3细胞细胞外信号调节激酶(ERK)1/2 mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平.结果 MTT法检测:姜黄素明显抑制前列腺癌PC-3细胞的体外增殖,40μmol/L、20μmol/L、10μmol/L、5μmol/L组在细胞生长1 d、2 d、4 d和6 d后细胞抑制率明显高于对照组,差异均有统计学意义(χ2分别=8.36、7.89、5.89、5.35;8.03、7.69、6.17、5.57;8.84、8.53、7.39、6.76;11.58、9.86、8.20、7.26,P均<0.05),且不同浓度姜黄素实验组在细胞生长1 d、2 d、4 d和6 d,细胞抑制率随药物浓度的增加而上升(F分别=5.65、4.63、4.64、5.76,P均<0.05).实时荧光定量PCR检测:姜黄素浓度与ERK1/2 mRNA的表达水平成反比,40μmol/L、20μmol/L、10μmol/L、5μmol/L组在细胞生长2 d、4 d、6 d的ERK1/2 mRNA表达均明显低于对照组,差异均有统计学意义(t分别=8.76、8.13、7.69、6.86;8.56、8.16、7.76、6.85;9.03、8.68、8.11、7.27,P均<0.05),且随着作用时间的增加,5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L浓度条件下的ERK1/2 mRNA水平逐渐降低(F分别=4.35、4.99、4.05、4.28,P均<0.05).蛋白质印迹法:40μmol/L姜黄素抑制ERK1/2的磷酸化呈时间依赖性,即随时间的延长下调p-ERK1/2表达的活性.结论 姜黄素对人前列腺癌PC-3细胞株增殖具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制ERK1/2 mRNA及p-ERK1/2蛋白的表达有关.