永生化人肝细胞中TNK1介导细胞凋亡的机制研究

摘要

目的 探究酪氨酸激酶非受体1(TNK1)在永生化人肝细胞中介导细胞凋亡的机制.方法 采用免疫组织化学法检验TNK1在人肝细胞癌和正常组织中的表达水平,流式细胞术检测被激活细胞凋亡的细胞比例,逆转录病毒载体包装感染法构建人永生化肝细胞系IHH rtTA-TNK1细胞模型,免疫印迹法检测TNK1和细胞凋亡相关蛋白的表达.结果 TNK1在人肝细胞癌细胞组织中表达水平明显低于正常组织;TNK1激活c-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3、c-caspase-9的表达;TNK1使线粒体中的细胞色素C部分转移至细胞质中;TNK1上调Bak并降低B淋巴细胞瘤(Bcl)-xL、Mcl-1的蛋白水平.结论 在永生化人肝细胞中TNK1介导了Bcl-2家族蛋白表达水平使线粒体外膜通透性增加,导致细胞色素C释放从而激活caspase-9和caspase-3,最终诱导细胞凋亡.