hTERT基因启动子驱动eGFP的慢病毒载体构建及表达的初步研究

摘要

目的 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因启动子驱动eGFP报告基因的慢病毒载体,观察eGFP在肿瘤细胞中的表达情况.方法 用hTERT基因启动子取代慢病毒载体eGFP上游的CMV启动子;将重组慢病毒载体pLenti-phTERT-eGFP用脂质体介导法转入端粒酶阳性的293FT、HepGⅡ、SGC7901细胞及端粒酶阴性的U2OS细胞中进行功能鉴定,以慢病毒载体pLenti-pCMV-eGFP作为对照,倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况.结果 在端粒酶阳性的3株细胞中均可以观测到绿色荧光蛋白表达;在端粒酶阴性的U2OS细胞中无绿色荧光蛋白表达.结论 hTERT基因启动子在端粒酶表达阳性的细胞中具有较强转录活性;所构建的慢病毒载体为进一步研究、利用hTERT基因启动子提供了较好的实验工具.