米诺环素促进PC12细胞氧糖剥夺/复氧后神经突生长及机制研究

摘要

目的 观察米诺环素对PC12细胞氧糖剥夺/复氧损伤后神经突生长的影响.方法 将体外培养的PC12细胞随机分为正常组、模型组(OGD/R)、米诺环素组(1μmol/L,MC+OGD/R)和MLCP抑制剂组(1nmol/L Calyculin A).以氧糖剥夺6 h/复氧模拟体外脑缺血再灌注损伤对PC12细胞进行处理,复氧24 h后采用CCK-8法测定PC12细胞的存活率,Western blot法测定肌球蛋白轻链(MLC)及磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)的表达,细胞免疫荧光染色标记PC12细胞轴突,荧光显微镜下观察轴突长度.结果 米诺环素组PC12细胞存活率明显高于模型组[(77.7±3.3)％vs.(48.6±3.2)％,P＜0.05],氧糖剥夺/复氧损伤引起PC12细胞神经突回缩,米诺环素组PC12细胞神经突平均长度较模型组增加[(44.79±5.36)μm vs.(15.75±5.92)μm,P＜0.05],MLCP抑制剂组能阻断米诺环素的轴突生长促进作用.此外,模型组PC12细胞MLC磷酸水平明显高于米诺环素组[1.02±0.12 vs.0.33±0.07,P＜0.05].结论 米诺环素通过激活MLCP/MLC信号通路,使MLC磷酸化水平下降,促进PC12细胞氧糖剥夺/复氧后神经突的生长.