腺病毒介导反义c-myc基因诱导人肝癌细胞凋亡的分子机制

摘要

目的:观察重组腺病毒介导反义c-myc基因(Ad-ASmyc)诱导体外培养不同人肝癌细胞系凋亡的差异并探讨其分子生物学机制.方法:Ad-ASmyc感染人肝癌细胞系后,观察细胞生长形态变化,通过细胞生长存活率、流式细胞仪分析、RT-PCR、Western Blot分析Ad-ASmyc对人肝癌细胞系BEL-7402、QSG-7701、SMMC-7721和HCC-9204细胞凋亡诱导、c-myc和bcl-2基因表达的影响.结果:Ad-Asmyc可高效转导4种人肝癌细胞系(BEL-7402、QSG-7701、SMMC-7721和HCC-9204细胞),镜下可见细胞凋亡的形态学变化并出现"凋亡小体",细胞存活率分别为对照组的(37.7%、49.3%、51.3%和43.1%),诱导肝癌细胞GI期阻滞和凋亡,4种人肝癌细胞系均为c-myc、bcl-2 RNA及c-myc蛋白水平高表达,但表达水平有差异,Ad-ASmyc作用后,其表达水平均明显下降.结论:重组腺病毒介导的反义c-myc基因能够诱导体外培养人肝癌细胞凋亡,引起人肝癌细胞c-myc、bcl-2 RNA及c-myc蛋白表达下调和细胞生长抑制,其诱导凋亡的程度与肝癌细胞内的c-myc表达水平密切有关.