淫羊藿黄酮与淫羊藿苷对APP转基因小鼠大脑伊淀粉样肽及α-synuclein的影响

摘要

目的：β淀粉样肽前体蛋白（APP）经淀粉源途径水解产生过量Aβ表达是AD病理发生、发展级联反应的主要起始病因和重要病理机制。β分泌酶BACE是产生β-淀粉样肽（Aβ）的淀粉源途径中的重要分泌酶，对Aβ生成有直接影响。α-synuclein（α-syn）是AD病人脑内老年斑的核心成分的前体蛋白。本实验的拟观察淫羊藿黄酮和淫羊藿苷对APP转基因小鼠脑内APP、BACE蛋白表达、A8含量及淀粉样斑块数量及α-syn表达的影响。方法：用药组小鼠自4月龄开始灌胃给予淫羊藿黄酮小（30mg／kg／d）、大剂量（100mg／kg／d）及淫羊藿苷小（18mg／kg／d）、大剂量（58mg／kg／d）6个月至10月龄，正常对照组、转基因阴性对照组及模型组以同样方式灌胃给予蒸馏水。应用免疫组化学及Western blot方法分别检测海马CAl区及皮层中APP、BACE和α-syn的表达，采用双抗体夹心ELISA试剂盒测定海马中不溶性Aβ-42含量，采用刚果红染色和Bielsehowsky镀银染色法检测淀粉样斑块，采用免疫荧光双标染色方法分别检测Aβ与淀粉样纤维、α-syn与Aβ及淀粉样纤维共表达。结果：10月龄的APP转基因小鼠大脑海马和皮层APP、BACE、α-syn表达及海马不溶性Aβ1-42含量明显增加，海马和皮层淀粉样斑块数量明显增加，并且淀粉样纤维与Aβ1-42在海马CAl区、齿状回和皮层顶叶存在共定位关系，提示转基因小鼠脑内淀粉样斑块形成与Aβl-42密切相关。结论：10月龄的APP转基因小鼠脑内存在多种拟AD痴呆样病理改变，是较好的拟AD痴呆动物模型。淫羊藿黄酮和淫羊藿苷能减少APP转基因模型小鼠脑内Aβ经由淀粉源途径生成及含量，并能降低α-syn表达，从而减少Aβ与α-syn彼此促进的淀粉样纤维聚集，对防治AD等神经退行性疾病具有良好的应用前景。