利用ForteBio OctetRed多通道生物分子相互作用系统非标记实时检测小分子和蛋白质结合的动力学常数

摘要

测定评价小分子和治疗靶点蛋白结合的亲和力在药物开发和先导化合物优化过程中很重要。我们使用一种新的无需标记的方法来检测碳酸酐酶和一些小分子抑制物（〈500Daltons）结合的动力学常数，包括速率常数和亲和常数。ForteBio的OctetRED系统检测生物分子相互作用时不需要标记，八通道同时检测，待检测的样品可以放在96孔板中。该系统检测时基于生物膜层反射光干涉技术（BioLayer Interferomelry），简单地说，光纤制成的生物传感器（Biosensor）底端覆盖了生物分子相容层，可以用来固定相互作用分子中的一个，形成生物膜层，当具有一定带宽的可见光入射生物膜层时，根据薄膜干涉的简化模型和光线反射折射定律，入射光线在生物膜层表面被分成两部分，形成第一部分反射光．进入生物层的透射部分在生物层的第二个界面产生反射，形成第二部分反射光。光束垂直入射时，两部分反射光形成干涉波，被光谱仪所检测。相互作用发生时，生物层厚度增加，反射光干涉光谱曲线整体向波长增加方向移动。分子结合或解离时，都会导致干涉曲线的漂移，这种变化可以被实时监测。