白首乌C-21甾体总苷通过TGF-β1/Smad信号通路干预人肝星状细胞活化的机制

摘要

目的 研究白首乌C-21甾体总苷(TCSG)体外对LX-2活化的影响及其作用机制.方法 实验分为:对照组、TGF-β1+LPS组、TGF-β1+LPS联合TCSG药物干预低、中、高浓度(10,20,40 mg·L-1)组.MTT法检测细胞活力,试剂盒检测细胞上清液中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,免疫荧光染色观察LX-2细胞活化标志物 α-SMA表达情况,Western blot法检测TCSG干预前后LX-2细胞中TGF-β1,Smads蛋白相对表达量变化.结果 MTT实验结果显示40-100 mg·L-1 TCSG处理细胞48 h后,均对细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05,P<0.01).与对照组相比,TGF-β1+LPS组HYP含量显著升高,而经TCSG处理后HYP含量有明显降低(P<0.05,P<0.01).免疫荧光染色结果显示,TGF-β1+LPS诱导组α-SMA表达较对照组有明显增强,而经TCSG处理后降低.与TGF-β1+LPS组相比,TCSG处理组下调LX-2细胞内TGF-β1,α-SMA,p-Smad2/Smad2,p-Smad3/Smad3及NF-κB蛋白表达,显著上调IκB-α表达(P<0.05,P<0.01).结论 TCSG体外能明显抑制TGF-β1联合LPS诱导的人肝星状细胞的活化,且与调控TGF-β1/Smad信号通路有关.