二氢杨梅素通过TFEB-自噬途径抑制地塞米松诱导的成骨细胞凋亡

摘要

目的 观察二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导成骨细胞系MC3T3-E1细胞凋亡的影响并探寻其机制.方法 用10、20和40μmol·L-1 DMY处理MC3T3-E1细胞0.5 h,再加入10μmol·L-1 DEX继续共同培养12 h.检测细胞增殖和凋亡水平及细胞超微结构,Western blot检测自噬相关基因和TFEB表达.结果 与DEX组比较,DEX+DMY(20和40μmol·L-1)组细胞的凋亡率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).与DEX组比较,DEX+DMY(20μmol·L-1)组细胞中自噬体的数量、自噬体占胞质面积百分率、Beclin-1和LC3-Ⅱ的蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显减少,p62蛋白表达明显上调,差异有统计学意义(均P<0.05).雷帕霉素部分取消了DMY的效应.与DEX组比较,DEX+DMY(20μmol·L-1)组细胞中TFEB在细胞核中和总蛋白表达及两者比值均明显降低,差异有统计学意义(均P<0.05).结论 DMY抑制了DEX诱导的成骨细胞的凋亡,其机制可能与DMY下调TFEB表达,抑制其核转位而抑制细胞自噬有关.