白藜芦醇通过下调MnSOD诱导类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡

摘要

目的 探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白表达改变在白藜芦醇(Res)介导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)的增殖和凋亡中的作用.方法 Res处理RA-FLSs后,CCK-8法检测细胞增殖,Western blot检测Mn-SOD蛋白表达水平;慢病毒感染RA-FLSs后,8 mg·L-1的嘌呤霉素筛选感染后细胞,以此建立3种稳定细胞系:MnSOD过表达、MnSOD干扰、MnSOD对照;激光共聚焦显微镜检测每种细胞系在5μmol·L-1过氧化氢(H2 O2)和200μmol·L-1 Res处理后线粒体活性氧(mtROS)水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平.结果 Res抑制RA-FLSs增殖,降低细胞内MnSOD表达;荧光倒置显微镜与Western blot检测证实慢病毒可高效感染RA-FLSs,使MnSOD表达上调和抑制.与对照组相比,在同种因素处理下,MnSOD过表达组mtROS水平降低,凋亡细胞减少.而MnSOD干扰组则呈现相反的结果.结论 Res可通过抑制MnSOD表达来上调mtROS水平,从而促进RA-FLSs凋亡.