扇贝多肽经由死亡受体和线粒体通路抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡

摘要

目的 从凋亡相关分子Fas(CD95)、半胱天冬酶-3(caspase-3)和活性氧(ROS)、细胞色素C的角度,研究扇贝多肽(polypeptide from Chlamys farreri,PCF)抑制UVB引起的人角质HaCaT细胞凋亡的分子机制.方法 实验设计为5组:对照组、UVB模型组、UVB+5.69 mmol·L-1PCF组、UVB+2.84 mmol·L-1PCF组、UVB+1.42 mmol·L-1PCF组.应用小干扰RNA(siRNA)干扰UVB辐射的HaCaT细胞的Fas表达;琼脂糖凝胶电泳分析Fas siRNA及ROS清除剂NAC对细胞凋亡的影响;以DCFH-DA为荧光探针,检测细胞内ROS的含量;免疫印迹法检测细胞色素C及用RNAi干扰降低Fas表达后caspase-3的表达.结果 干扰Fas后,UVB辐射的HaCaT细胞凋亡受到明显抑制及caspase-3的表达降低;NAC对UVB诱导的HaCaT细胞凋亡有抑制作用;1.42～5.69 mmol·L-1剂量范围内的PCF可剂量依赖性抑制UVB引起的ROS的生成及细胞色素C的释放.结论 PCF可抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡,其作用机制与抑制Fas-caspase-3及ROS-细胞色素C通路有关.