氯化锂抑制β-淀粉样蛋白诱导细胞Tau蛋白磷酸化

摘要

目的 探讨GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl)在β-淀粉样蛋白25～35片断(Aβ25-35)诱导的细胞Tau蛋白磷酸化中的作用及机制.方法 MTT法观察不同浓度的LiCl(1、5、10、20 mmol·L-1)单独作用24 h,对SH-SY5Y细胞存活率的影响;20 μmol·L-1的凝聚态Aβ25-35作用于SH-SY5Y细胞不同时间点,蛋白免疫印迹法研究Tau蛋白磷酸化位点(Ser199、Ser396及Tau1)水平的变化;LiCl(20 mmol·L-1)预处理细胞1 h后,观察Aβ的作用有无变化及可能的作用机制.结果 不同浓度的LiCl作用24 h后,MTT法示细胞存活率无明显变化(P＞0.05);20 μmol·L-1 Aβ25-35作用不同时间点后,Tau蛋白在Ser396、Ser199位点的磷酸化水平在3 h逐渐增加,6 h达到最高峰,12 h后又逐渐下降,在这3个时间点的增加量均具有统计学意义(P＜0.05),而对非磷酸化Tau1没有影响(P＞0.05);LiCl预处理可抑制Aβ25-35的作用(P＜0.05),并可诱导失活形式的GSK-3β在Ser 9位点的磷酸化(p-GSK-3βSer9)表达增高.结论 GSK-3β参与了Aβ25-35诱导细胞Tau蛋白磷酸化的作用,LiCl可通过诱导失活形式的p-GSK-3βSer9表达增高而抑制GSK-3β的活性,进而抑制Aβ诱导的细胞Tau蛋白磷酸化.该实验为研究AD的发病机制及探索有效治疗药物提供了重要的理论基础.