烙铁头蛇毒中一个具有抗补体活性金属蛋白酶的纯化和性质研究

摘要

目的 从烙铁头蛇毒中筛选分离抗补体活性蛋白,并对其部分生物学活性开展研究,以了解其在蛇伤中的病理生理作用和潜在的应用价值.方法 采用蛋白层析技术分离纯化抗补体活性蛋白,测定其分子量、等电点、抗补体作用、多种蛋白水解酶活性、水肿活性及出血活性.结果 从烙铁头蛇毒中分离纯化出一个抗补体活性蛋白TMAC-1,表观分子量约为25 ku,等电点为9.0.TMAC-1能够抑制补体经典途径和替代途径的溶血,预孵条件下,其IC50分别为62、29 mg·L-1;不预孵条件下,其IC50为263、246 mg·L-1.TMAC-1能够裂解C3、C5,但裂解产物不能诱导内皮细胞P-selectin的表达.TMAC-1能依次降解纤维蛋白原的Aα、Bβ、γ链,该活性能被EDTA、1,10-phenanthroline、EGTA完全抑制,不受PMSF、SBTI的抑制.TMAC-1具有水肿活性和微弱的偶氮酪蛋白水解活性,没有精氨酸酯酶水解活性和皮下出血活性.结论 TMAC-1是一个非出血性的金属蛋白酶,它可通过酶切补体特定成分抑制补体激活.