siRNA抑制精胺氧化酶的表达可降低人A549肺癌细胞对多胺类似物CPENSpm的敏感性

摘要

目的 研究精胺氧化酶(spermine oxidase,SMO)基因表达抑制对多胺类似物CPENSpm抗瘤活性的影响.方法 用siRNA技术获得SMO基因表达抑制的人A549肺癌细胞株,QT-RT-PCR法和酶活性分析法用于鉴定SMO基因的表达水平,MTT法检测细胞的存活率,DNA降解分析和流式细胞/亚凋亡峰分析检测细胞凋亡状况.结果 成功获得SMO基因表达抑制的人A549肺癌细胞株.用SMO-siRNA质粒转染的细胞中,SMO mRNA和酶活性的基础水平分别降低53%和14%.用10 μmol·L~(-1) CPENSpm处理对照细胞24 h可使SMO mRNA和酶活性分别升高10倍和20倍,但在SMO-siRNA质粒转染的细胞中,这种药物对SMO的表达诱导被抑制.细胞增殖实验发现,SMO表达抑制的细胞对CPENSpm(0～20 μmol·L~(-1))的药物敏感性低于对照细胞.细胞凋亡分析发现,与对照细胞相比,CPENSpm诱导SMO表达,抑制细胞发生细胞凋亡的能力明显减弱.结论 CPENSpm诱导肿瘤细胞内SMO高表达可能是其抗癌药理活性的分子基础之一.