虾青素纳米乳液对大鼠全层皮肤缺损创面的愈合和愈后瘢痕增生的影响及其作用机制研究

摘要

目的本实验拟探讨虾青素纳米乳液对SD大鼠全层皮肤缺损创面的愈合和愈合后瘢痕增生的影响及其初步机制。方法24只雄性SD大鼠,用随机数字表法分为空白对照组、模型组、积雪苷霜软膏阳性对照组和虾青素纳米乳液实验组,每组6只,采用全层皮肤缺损法进行动物模型制作,其中空白对照组仅做禁食、麻醉及剃毛处理,而不进行实际的造模手术。药物干预阳性对照组和实验组在术后次日分别涂覆500 mg积雪苷霜软膏和等量虾青素纳米乳液于每个创面,每日2次,并在术后第1、3、6、7、9、11、14、18、21、28天测量其创面或瘢痕面积,第2、3、4周时进行稍大于造模范围皮肤全层的取材,利用苏木精-伊红(HE)、马苏(Masson)染色分别观察不同时期皮肤组织中成纤维细胞和胶原纤维的形态、分布、含量等;蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)检测第4周皮肤组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、白介素6(IL-6)以及凋亡自噬相关因子。对数据行单因素方差分析处理。结果在整个实验过程中,给药组较模型组愈合更快,瘢痕愈合质量更高;第4周时,虾青素纳米乳液给药组成纤维细胞数密度低于积雪苷霜组(P<0.05);胶原纤维面密度较积雪苷霜组降低也更为显著(P<0.01);WB实验结果显示第4周时,虾青素组与积雪苷霜组的α-SMA无明显差异,但均低于模型组水平,且差异具有统计学意义;虾青素组IL-6蛋白表达低于模型组水平(P<0.01),但积雪苷霜组IL-6蛋白表达水平却明显高于其他两组(P<0.001);虾青素组的促凋亡因子Bcl-2相关X蛋白(Bax)和磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)通路相关蛋白的表达显著增加(P<0.05)。结论虾青素纳米乳液可促进大鼠皮肤创面愈合、减少愈合后成纤维细胞的增殖和胶原生成、抑制纤维化、减轻炎症、抑制瘢痕挛缩,从而改善皮肤创面增生性瘢痕的发生发展,其机制可能与诱导凋亡、激活PI3K/Akt/mTOR通路下调自噬有关。