重组结核分枝杆菌RpfE蛋白对BCG休眠菌的促生长作用

摘要

目的 观察重组结核分枝杆菌RpfE蛋白对BCG的促生长作用.方法 将测序正确的Rv2450c基因克隆到表达载体pET32a(+)中,获得RpfE蛋白,在变性条件下对目的 蛋白进行亲和层析纯化.将纯化的蛋白分别与结核病人血清,Rpf单抗和Rpf结构域单抗进行Western blot分析.分别将10pmol/L和100pmol/L的RpfE加入到休眠BCG的培养基中,观察RpfE蛋白对BCG的促生长作用.结果 得到融合组氨酸残基的重组RpfE蛋白,Western blot结果 显示该蛋白分别与活动期结核病人血清,Rpf单抗和Rpf结构域单抗在40kDa处发生反应.100pmol/L的RpfE蛋白对BCG休眠菌具有明显的复苏和促生长作用.结论 构建了Mtb Rv2450c基因的重组表达载体,纯化获得了RpfE重组蛋白,该蛋白对BCG休眠菌具有复苏和促生长作用.