犬瘟热病毒受体SLAM TaqMan荧光定量PCR方法的建立

摘要

为了建立TaqMan荧光定量PCR方法来快速检测水貂淋巴细胞上的犬瘟热病毒受体信号淋巴细胞激活分子(SLAM),根据水貂SLAM基因的保守区域,设计1对特异引物和探针,通过优化反应条件,并进行敏感性试验、重复性试验和水貂外周血淋巴细胞检测试验.结果 表明,建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法最低检出量可达4.9个拷贝;组内重复和组间重复Cq值变异系数均小于1％;应用该方法可成功检出犬瘟热病毒感染前后水貂外周血淋巴细胞中的SLAM基因的表达情况.表明建立的检测方法敏感性高,重复性好,可以用于犬瘟热病毒与SLAM受体互作以及致病机制的研究.