一种基于16S rRNA基因检测猪嗜血支原体PCR方法的建立

摘要

本试验目的是建立一种基于16S rRNA基因检测猪嗜血支原体的PCR方法.根据GenBank上猪嗜血支原体16SrRNA基因(ID:U88565)设计特异引物,对哈尔滨采集病料进行PCR并克隆pMD18-T,测序所扩增的片段为411bp,同源性分析表明,该序列与参考序列同源性97.57％.特异性和敏感性试验表明,所建立的PCR诊断方法对猪肺炎支原体、大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌无交叉反应；血液基因组DNA最小检出量为0.75 fg/μL.该方法具有快速、特异、敏感等特点,为猪嗜血支原体病的快速诊断及流行病学调查提供了新的手段.