灰树花gpd-GF启动子的克隆与表达载体的构建

摘要

根据已经报道有强启动子活性的香菇gpd启动子设计引物,从灰树花基因组PCR扩增获得大小分别为1 018,615 bp的2个片段gpd-GF1和gpd-GF2.通过DNA序列测定得知二者的大小分别为1 018,615 bp.经NCBI中的BLASTN比较,gpd-GF1,gpd-GF2与已报道的香菇中克隆的gLeGPD基因上游序列的同源性分别为96%,98%.通过启动子预测软件分析,结果表明,gpd-GF1和gpd-GF2含有多个顺式作用元件如TATAbox,GATA box,CAAT box等,初步证实gpd-GF1,gpd-GF2可能有较强的启动子活性.将gpd-GF1,gpd-GF2分别与切除CaMV35S启动子的pCAMBIA1301大片段进行亚克隆,构建成表达载体pCBgpdGF1和pCBgpdGF2.