环状RNA circHIPK3调控微RNA124表达促进口腔鳞状细胞癌细胞增殖的研究

摘要

目的探讨口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中环状RNAcircHIPK3的表达及临床意义,并探索circHIPK3调控微RNA124表达对OSCC细胞增殖的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测90例2016年1月至2017年5月于南昌大学第二附属医院的OSCC患者癌组织、配对的癌旁组织及OSCC细胞株CAL27、SCC15和人正常口腔角质细胞株hNOK中circHIPK3的表达水平并分析其与患者临床病理特征关系。设计合成circHIPK3的靶向小干扰RNA si-circHIPK3和阴性对照序列si-NC,分别转染CAL27和SCC15细胞,细胞计数（cell counting kit-8,CCK-8）检测circHIPK3对CAL27和SCC15细胞增殖能力的影响。实时荧光定量PCR检测微RNA124在OSCC中的表达,分析circHIPK3的表达与微RNA124表达的相关性。CAL27和SCC15细胞分别转染si-circHIPK3和si-NC,实时荧光定量PCR检测细胞中微RNA124表达变化。CAL27和SCC15细胞分别转染si-NC、si-circHIPK3、微RNA124模拟物、si-circHIPK3+微RNA124抑制物,CCK-8法检测OSCC细胞增殖的变化。结果 OSCC组织中circHIPK3表达水平[2.23（1.86,3.00）]显著高于癌旁正常组织[1.05（0.85,1.26）,U=1 094,P=0.000]。CAL27（3.02±0.51,P=0.000）和SCC15细胞（3.16±0.75,P=0.000）中circHIPK3表达水平均显著高于hNOK细胞（1.26±0.30）。circHIPK3在不同临床分期及不同细胞分化程度患者癌组织中表达差异均有统计学意义（P＜0.05）。抑制circHIPK3表达后,CAL27和SCC15细胞增殖能力受到明显抑制,差异均有统计学意义（P＜0.05）。OSCC组织中微RNA124表达水平（0.61±0.35）较癌旁正常组织显著下调（1.13±0.39,t=-5.36,P＜0.05）。相关性分析显示OSCC组织中circHIPK3的表达与微RNA124呈显著负相关（r=-0.767,P＜0.001）。与沉默circHIPK3相比,在沉默circHIPK3的CAL27和SCC15细胞中加入微RNA124抑制物共转染之后,沉默circHIPK3抑制细胞增殖的能力部分逆转。结论 OSCC中circHIPK3的表达水平上调,下调circHIPK3的表达水平可抑制OSCC细胞的增殖,circHIPK3可能通过调控微RNA124表达参与OSCC的发生和发展过程。