粒细胞集落刺激因子对急性辐射损伤小鼠胸腺细胞亚群及其近期输出功能的影响

摘要

目的观察粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对急性辐射损伤小鼠胸腺细胞亚群重建及近期输出功能的影响。方法雌性BALB/c小鼠50只给于6 Gy60Co 1次性全身照射后随机均分为GCSF组和对照组。GCSF组小鼠给予重组人G-CSF 100μg.kg-1.d-1皮下注射,连续14 d,对照组小鼠给予等体积磷酸盐缓冲液（PBS）皮下注射,连续14 d。照后7、14、21和28 d颈部脱臼处死小鼠,取出胸腺制成单个核细胞悬液,使用流式细胞仪检测胸腺双阴性细胞发育4阶段（DN1～4）细胞比例的变化,以及CD4+CD8+、CD4+CD8-、CD4-CD8+细胞亚群的比例。使用荧光定量PCR的方法检测照后30和60 d 105个胸腺细胞中T细胞受体重排删除环（sjTREC）拷贝数,判断胸腺输出功能。结果照后7 d,胸腺DN细胞大量增殖,DN1细胞比例下降,DN4细胞比例增高,GCSF组DN1细胞比例在此时间点明显高于对照组（t=9.59,P＜0.05）。照后21 d GCSF组DN3、DN4细胞比例均分别高于对照组（t=16.37、7.6,P＜0.05）。照后7 d CD4+CD8+细胞比例降至最低,14 d出现反弹,21 d再次下降,以后逐渐恢复,照后28 d GCSF组CD4+CD8+细胞比例恢复正常并明显高于对照组（t=12.22,P＜0.05）。G-CSF对胸腺CD4+CD8-细胞比例影响不大。照后21 d GCSF组CD4-CD8+细胞比例明显高于对照组（t=3.77,P＜0.05）。荧光定量PCR结果提示照后30 d GCSF组胸腺细胞sjTREC拷贝数明显高于对照组（t=5.95,P＜0.01）,但照后60 d两组胸腺细胞sjTREC拷贝数差异无统计学意义。结论 G-CSF可促进急性辐射损伤小鼠胸腺双阴性及双阳性细胞的增殖、分化,提高胸腺输出功能,加快中枢免疫重建。