肝脏再生增强因子cDNA的克隆及稳定细胞株的建立

摘要

目的通过对人源肝脏再生增强因子（ALR）cDNA进行克隆及活性的初步鉴定,为基因工程制备重组人肝脏ALR（hALR）提供资料。方法提取人胎肝总RNA,通过RT-PCR获得hALR cDNA,构建真核表达质粒pcDNA3.1-ALR,转化大肠杆菌扩增质粒。将质粒pcDNA3.1与pcDNA3.1-ALR分别转染HepG2细胞,G418筛选建立稳定细胞株,MTT法检测hALR的生物学活性。结果测序证实克隆得到的hALR序列完全正确。MTT比色结果,转染hALR的细胞增殖高于转染空质粒和未转染细胞（P＜0.05）。结论hALR具有促肝细胞增殖的作用。