两株H9N2亚型禽流感病毒的遗传演化及其致病性分析

摘要

为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的分子特征及其对家禽和哺乳动物小鼠的致病性,本研究对2020年分离到的两株H9N2亚型AIV:A/chicken/Jiangsu/S1625/2020 (H9N2)(简称CK/JS/S1625/2020)株和A/duck/Sichuan/S1537/2020(H9N2)(简称DK/SC/S1537/2020)株,进行了基因组测序、序列分析及其对SPF鸡、鸭和BALB/c小鼠的致病力评价.同源性分析结果显示,两株病毒HA和NA基因的同源性分别为93.3％和95.8％,其编码氨基酸序列的同源性分别为95.4％和95.9％,同源性较低.且两株病毒HA蛋白裂解位点分别为333PSRSSR↓GLF341、333pSRSNR ↓ GLF341,均不存在多个连续的碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒(LPAIV) HA序列特征.两株病毒的HA蛋白均为典型的人源受体结合特征,即155T、183N和226L.遗传演化分析结果显示,两株病毒的HA、NA基因均属于欧亚分支,但二者的亲缘关系较远.鸡感染性试验结果显示,CK/JS/S1625/2020株感染组鸡可通过喉头和泄殖腔向外界环境排毒.虽然在全部鸡的喉头中检测到了DK/SC/S1537/2020株,但仅在部分鸡的泄殖腔检测到了该病毒,且喉头的排毒量明显高于泄殖腔.鸡血清抗体检测结果显示,两株病毒感染鸡血清的HI抗体全部阳转,效价在1:128～1:2048.表明,鸡源H9N2病毒比鸭源H9N2病毒在鸡体内的适应性和复制能力更强;鸭感染性试验结果显示,两株病毒均只能通过鸭的喉头向外界环境排毒,但病毒滴度均较低,且均不能在鸭体内有效复制;小鼠感染性试验结果显示,两株病毒仅能在小鼠的鼻甲中有效复制,而在小鼠的脑、脾脏和肾脏中均未检测到病毒.以上结果表明两株H9N2亚型AIV对家禽和小鼠均呈低致病力.本研究为进一步了解H9N2 AIV提供了一定的参考数据,有必要对自然界中传播的H9N2流感病毒持续监测和进化分析.