旋毛虫ES抗原对小鼠腹腔巨噬细胞NOD1受体通路影响的研究

摘要

为了解旋毛虫ES抗原对宿主巨噬细胞NOD1受体通路的影响,本研究通过体外实验将旋毛虫ES抗原作用于小鼠腹腔巨噬细胞,观察NOD1受体及其信号通路中关键分子及相关细胞因子的表达动态.应用荧光定量PCR监测细胞内NOD1、RIP2和NF-κB mRNA的转录水平,western blot测定NOD1、RIP2、NF-κ Bp65、NF-κB p-p65蛋白表达量,ELISA测定细胞培养上清中TNF-α、Ⅱ-1β和Ⅱ-6含量变化.结果 显示,在一定的ES抗原作用浓度和时间范围内,巨噬细胞中各目的基因的转录水平均先增高,当作用时间和作用浓度超过一定值时则开始下降,作用24h时NOD1 mRNA转录水平显著低于对照组(p＜0.01);ES抗原浓度15 μg/mL作用时间9h时,巨噬细胞中NOD1、RIP2和NF-κB p-p65蛋白量显著增加(P＜0.01),此时巨噬细胞培养上清中TNF-α、IL-Iβ、Ⅱ-6含量显著增高(p＜0.01).结果 表明,旋毛虫ES抗原在一定的作用时间和浓度范围内,可以激活并调节小鼠腹腔巨噬细胞中NOD1受体通路,上调NOD1受体通路中关键分子RIP2和下游分子NF-κB的表达,可以促进细胞因子TNF-α、Ⅱ-1β和IL-6的分泌;并且超过一定时间和浓度的ES抗原刺激可以导致小鼠腹腔巨噬细胞出现免疫耐受.本研究证明了宿主NOD1受体参与了旋毛虫引起的宿主免疫应答,为旋毛虫病防治和理解旋毛虫对宿主的感染机制提供新的思路.