核酸探针检测犬冠状病毒方法的建立和初步应用

摘要

以32P标记犬冠状病毒特异性RT-PCR产物制成核酸探针,与CCV NL-18株、犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒、狂犬病病毒反转录产物、正常CRFK细胞以及做10～10 000倍稀释的CCV NL-18株反转录产物杂交,进行核酸探针的敏感性和特异性试验.结果表明,该探针仅与CCV NL-18株反转录产物呈阳性杂交,与对照病毒和正常细胞反转录产物均呈阴性反应.初步应用试验结果,该探针可与国内CCV分离病毒YS1、CI1株杂交,且可从8份腹泻犬粪便中检出5份CCV阳性病料.本研究为在我国开展犬冠状病毒感染的分子流行病学调查和临床诊断提供了一种敏感、特异的检测方法.