猪戊型肝炎病毒ORF2片段克隆及原核表达

摘要

设计套式引物,内套引物含有BamH Ⅰ/XhoⅡ酶切位点,采用RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)结构蛋白基因ORF2部分片段,长度为634 bp,将其克隆于PGEX-T载体,测序结果表明插入的片段属于戊型肝炎病毒ORF2部分,将该片段插入PproEXHTb表达载体,经酶切鉴定证实获得了重组表达质粒.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,经1 mmol/L IPTG诱导,得到表达,表达蛋白分子量为27 Ku,以包涵体形式存在.Western blot分析表明,该蛋白可以与猪戊型肝炎阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的反应原性.